અસ્થિવા (OA) એ લાંબા ગાળાના ક્રોનિક ડીજનરેટિવ હાડકાના સાંધાના રોગોમાંનો એક છે જે 65 વર્ષથી વધુ વયની વસ્તીને અસર કરે છે.
1]. સામાન્ય રીતે, OA દર્દીઓને ક્ષતિગ્રસ્ત કોમલાસ્થિ, સોજોવાળા સિનોવિયમ અને ઇરોડેડ કોન્ડ્રોસાઇટ્સનું નિદાન થાય છે, જે પીડા અને શારીરિક તકલીફને ઉત્તેજિત કરે છે [
2]. સંધિવાનો દુખાવો મુખ્યત્વે બળતરા દ્વારા સાંધામાં કોમલાસ્થિના અધોગતિને કારણે થાય છે, અને જ્યારે કોમલાસ્થિને ગંભીર નુકસાન થાય છે ત્યારે હાડકાં એકબીજા સાથે અથડાઈને અસહ્ય પીડા અને શારીરિક મુશ્કેલીઓનું કારણ બને છે.
3]. પીડા, સોજો અને સાંધાની જડતા જેવા લક્ષણો સાથે બળતરા મધ્યસ્થીઓની સંડોવણી સારી રીતે દસ્તાવેજીકૃત થયેલ છે. OA દર્દીઓમાં, બળતરા સાઇટોકીન્સ, જે કોમલાસ્થિ અને સબકોન્ડ્રલ હાડકાના ધોવાણનું કારણ બને છે તે સાયનોવિયલ પ્રવાહીમાં જોવા મળે છે.
4]. OA દર્દીઓને સામાન્ય રીતે બે મુખ્ય ફરિયાદો પીડા અને સાયનોવિયલ બળતરા છે. તેથી વર્તમાન OA ઉપચારના પ્રાથમિક ધ્યેયો પીડા અને બળતરા ઘટાડવાનો છે. [
5]. બિન-સ્ટીરોઈડલ અને સ્ટીરોઈડલ દવાઓ સહિતની ઉપલબ્ધ OA સારવારોએ પીડા અને બળતરાને દૂર કરવામાં અસરકારકતા સાબિત કરી હોવા છતાં, આ દવાઓના લાંબા ગાળાના ઉપયોગથી ગંભીર આરોગ્ય પરિણામો આવે છે જેમ કે કાર્ડિયોવેસ્ક્યુલર, ગેસ્ટ્રો-આંતરડાની અને રેનલ ડિસફંક્શન [
6]. આમ, ઓસ્ટિઓઆર્થરાઈટીસની સારવાર માટે ઓછી આડઅસર સાથે વધુ અસરકારક દવા વિકસાવવી પડશે.
કુદરતી સ્વાસ્થ્ય ઉત્પાદનો સલામત અને સરળતાથી ઉપલબ્ધ હોવા માટે વધુને વધુ લોકપ્રિય થઈ રહ્યાં છે [
7]. પરંપરાગત કોરિયન દવાઓએ સંધિવા સહિત અનેક દાહક રોગો સામે અસરકારકતા સાબિત કરી છે.
8]. ઓકલેન્ડિયા લપ્પા ડીસી. તેના ઔષધીય ગુણધર્મો માટે જાણીતું છે, જેમ કે પીડાને દૂર કરવા અને પેટને શાંત કરવા માટે ક્વિના પરિભ્રમણને વધારવું, અને તેનો પરંપરાગત રીતે કુદરતી પીડાનાશક તરીકે ઉપયોગ થાય છે.
9]. અગાઉના અહેવાલો સૂચવે છે કે એ. લપ્પામાં બળતરા વિરોધી છે [
10,
11], પીડાનાશક [
12], કેન્સર વિરોધી [
13], અને ગેસ્ટ્રોપ્રોટેક્ટીવ [
14] અસરો. A. lappa ની વિવિધ જૈવિક પ્રવૃત્તિઓ તેના મુખ્ય સક્રિય સંયોજનોને કારણે થાય છે: કોસ્ટુનોલાઈડ, ડીહાઈડ્રોકોસ્ટસ લેક્ટોન, ડાયહાઈડ્રોકોસ્ટુનોલાઈડ, કોસ્ટુલેક્ટોન, α-કોસ્ટોલ, સોસ્યુરીયા લેક્ટોન અને કોસ્ટુલેક્ટોન [
15]. અગાઉના અભ્યાસો દાવો કરે છે કે કોસ્ટ્યુનોલાઈડ લિપોપોલિસેકરાઈડ (LPS) માં બળતરા વિરોધી ગુણધર્મો દર્શાવે છે, જે NF-kB અને હીટ શોક પ્રોટીન પાથવેના નિયમન દ્વારા મેક્રોફેજને પ્રેરિત કરે છે.
16,
17]. જો કે, OA સારવાર માટે A. lappa ની સંભવિત પ્રવૃત્તિઓ અંગે કોઈ અભ્યાસમાં તપાસ કરવામાં આવી નથી. હાલના સંશોધનમાં ઓએ (મોનોસોડિયમ-આયોડોએસેટેટ) MIA અને એસિટિક એસિડ-પ્રેરિત ઉંદર મોડલનો ઉપયોગ કરીને OA સામે A. lappa ની ઉપચારાત્મક અસરોની તપાસ કરવામાં આવી છે.
મોનોસોડિયમ-આયોડોએસેટેટ (MIA) નો ઉપયોગ મોટાભાગની પીડા વર્તણૂકો અને પ્રાણીઓમાં OA ની પેથોફિઝીયોલોજીકલ વિશેષતાઓ પેદા કરવા માટે થાય છે.
18,
19,
20]. જ્યારે ઘૂંટણની સાંધામાં ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવે છે, ત્યારે MIA કોન્ડ્રોસાઇટ ચયાપચયને અવ્યવસ્થિત કરે છે અને બળતરા અને બળતરાના લક્ષણોને પ્રેરિત કરે છે, જેમ કે કોમલાસ્થિ અને સબકોન્ડ્રલ હાડકાના ધોવાણ, OA ના મુખ્ય લક્ષણો
18]. એસિટિક એસિડ સાથે પ્રેરિત રાઇથિંગ પ્રતિભાવને વ્યાપકપણે પ્રાણીઓમાં પેરિફેરલ પીડાના સિમ્યુલેશન તરીકે ગણવામાં આવે છે જ્યાં દાહક પીડા માત્રાત્મક રીતે માપી શકાય છે [
19]. માઉસ મેક્રોફેજ સેલ લાઇન, RAW264.7, બળતરા માટે સેલ્યુલર પ્રતિભાવોનો અભ્યાસ કરવા માટે લોકપ્રિય રીતે ઉપયોગમાં લેવાય છે. LPS સાથે સક્રિય થવા પર, RAW264 મેક્રોફેજ બળતરાના માર્ગોને સક્રિય કરે છે અને TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS અને IL-6 [
20]. આ અભ્યાસે MIA પ્રાણી મોડેલ, એસિટિક એસિડ-પ્રેરિત પ્રાણી મોડેલ અને LPS-સક્રિય RAW264.7 કોષોમાં OA સામે A. લપ્પાની એન્ટિ-નોસીસેપ્ટિવ અને બળતરા વિરોધી અસરોનું મૂલ્યાંકન કર્યું છે.
2. સામગ્રી અને પદ્ધતિઓ
2.1. છોડની સામગ્રી
A. લપ્પા ડીસીના સૂકા મૂળ. પ્રયોગમાં વપરાયેલ ઇપુલિપ ફાર્માસ્યુટિકલ કંપની, લિ., (સોલ, કોરિયા) પાસેથી મેળવવામાં આવ્યું હતું. તેની ઓળખ પ્રો. ડોંગહુન લી, હર્બલ ફાર્માકોલોજી વિભાગ, કોરિયન મેડિસિન, ગાચોન યુનિવર્સિટીના કર્નલ દ્વારા કરવામાં આવી હતી અને વાઉચરનો નમૂનો નંબર 18060301 તરીકે જમા કરવામાં આવ્યો હતો.
2.2. A. લપ્પા અર્કનું HPLC વિશ્લેષણ
A. લપ્પાને રિફ્લક્સ ઉપકરણ (નિસ્યંદિત પાણી, 100 °C પર 3 કલાક) નો ઉપયોગ કરીને કાઢવામાં આવ્યો હતો. નીચા દબાણવાળા બાષ્પીભવકનો ઉપયોગ કરીને કાઢવામાં આવેલ દ્રાવણને ફિલ્ટર અને ઘટ્ટ કરવામાં આવ્યું હતું. A. લપ્પા અર્ક −80 °C નીચે ફ્રીઝ-ડ્રાયિંગ પછી 44.69% ની ઉપજ ધરાવે છે. A. lappa નું ક્રોમેટોગ્રાફિક વિશ્લેષણ 1260 InfinityⅡ HPLC-સિસ્ટમ (Agilent, Pal Alto, CA, USA) નો ઉપયોગ કરીને જોડાયેલ HPLC સાથે હાથ ધરવામાં આવ્યું હતું. રંગીન વિભાજન માટે, EclipseXDB C18 કૉલમ (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) નો ઉપયોગ 35 °C પર કરવામાં આવ્યો હતો. કુલ 100 મિલિગ્રામ નમૂનો 50% મિથેનોલના 10 એમએલમાં ભેળવવામાં આવ્યો હતો અને 10 મિનિટ માટે સોનિકેટ કરવામાં આવ્યો હતો. નમૂનાઓ 0.45 μm ના સિરીંજ ફિલ્ટર (વોટર્સ કોર્પ., મિલફોર્ડ, MA, યુએસએ) વડે ફિલ્ટર કરવામાં આવ્યા હતા. મોબાઇલ તબક્કાની રચના 0.1% ફોસ્ફોરિક એસિડ (A) અને એસેટોનાઇટ્રાઇલ (B) હતી અને સ્તંભ નીચે પ્રમાણે વિકૃત કરવામાં આવ્યો હતો: 0-60 મિનિટ, 0%; 60–65 મિનિટ, 100%; 65–67 મિનિટ, 100%; 67–72 મિનિટ, 1.0 એમએલ/મિનિટના પ્રવાહ દર સાથે 0% દ્રાવક B. 10 μL ના ઇન્જેક્શન વોલ્યુમનો ઉપયોગ કરીને 210 nm પર પ્રવાહ જોવા મળ્યો હતો. વિશ્લેષણ ત્રિપુટીમાં કરવામાં આવ્યું હતું.
2.3. એનિમલ હાઉસિંગ અને મેનેજમેન્ટ
5 અઠવાડિયાની ઉંમરના નર સ્પ્રેગ-ડૉલી (SD) ઉંદરો અને 6 અઠવાડિયાના નર ICR ઉંદરને સામટાકો બાયો કોરિયા (ગ્યોંગગી-ડો, કોરિયા) પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા. પ્રાણીઓને સતત તાપમાન (22 ± 2 °C) અને ભેજ (55 ± 10%) અને 12/12 કલાકના પ્રકાશ/શ્યામ ચક્રનો ઉપયોગ કરીને ઓરડામાં રાખવામાં આવ્યા હતા. પ્રયોગ શરૂ થાય તે પહેલાં પ્રાણીઓને એક અઠવાડિયાથી વધુ સમય માટે સ્થિતિથી પરિચિત કરવામાં આવ્યા હતા. પ્રાણીઓને ખોરાક અને પાણીનો પુરવઠો મર્યાદિત હતો. Gachon યુનિવર્સિટી (GIACUC-R2019003) ખાતે પ્રાણીઓની સંભાળ અને સંભાળ માટેના વર્તમાન નૈતિક નિયમોનું તમામ પ્રાણીઓની પ્રાયોગિક પ્રક્રિયાઓમાં સખતપણે પાલન કરવામાં આવ્યું હતું. આ અભ્યાસ તપાસકર્તા-આંધળો અને સમાંતર ટ્રાયલ ડિઝાઇન કરવામાં આવ્યો હતો. અમે એનિમલ એક્સપેરિમેન્ટલ એથિક્સ કમિટીની માર્ગદર્શિકા અનુસાર ઈચ્છામૃત્યુની પદ્ધતિને અનુસરી.
2.4. MIA ઈન્જેક્શન અને સારવાર
ઉંદરોને અવ્યવસ્થિત રીતે 4 જૂથોમાં વિભાજિત કરવામાં આવ્યા હતા, જેમ કે શામ, કંટ્રોલ, ઇન્ડોમેથાસિન અને એ. લપ્પા. 2% આઇસોફ્લોરેન O2 મિશ્રણ સાથે એનેસ્થેટાઇઝ કરવામાં આવતાં, પ્રાયોગિક OA તરફ દોરી જવા માટે ઉંદરોને 50 μL MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) નો ઉપયોગ કરીને ઘૂંટણના સાંધામાં આંતર-સાંધામાં ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા. સારવાર નીચે પ્રમાણે હાથ ધરવામાં આવી હતી: નિયંત્રણ અને શેમ જૂથો માત્ર AIN-93G મૂળભૂત આહાર સાથે જાળવવામાં આવ્યા હતા. માત્ર, ઈન્ડોમેથાસિન જૂથને એઆઈએન-93જી આહારમાં સમાવિષ્ટ ઈન્ડોમેથાસિન (3 મિલિગ્રામ/કિલો) પ્રદાન કરવામાં આવ્યું હતું અને એ. લપ્પા 300 મિલિગ્રામ/કિગ્રા જૂથને એ. લપ્પા (300 મિલિગ્રામ/કિલો) સાથે પૂરક એઆઈએન-93જી આહાર માટે સોંપવામાં આવ્યું હતું. દૈનિક ધોરણે 190-210 ગ્રામ શરીરના વજન દીઠ 15-17 ગ્રામના દરે OA ઇન્ડક્શનના દિવસથી 24 દિવસ સુધી સારવાર ચાલુ રાખવામાં આવી હતી.
2.5. વજન બેરિંગ માપન
OA ઇન્ડક્શન પછી, ઉંદરોના પાછળના અંગોનું વજન-વહન ક્ષમતા માપન અક્ષમતા-MeterTester600 (IITC લાઇફ સાયન્સ, વૂડલેન્ડ હિલ્સ, CA, USA) સાથે નિર્ધારિત મુજબ કરવામાં આવ્યું હતું. પાછળના અંગો પર વજન વિતરણની ગણતરી કરવામાં આવી હતી: વજન વહન ક્ષમતા (%)
