મીણબત્તી અને સાબુ બનાવવા માટે શુદ્ધ સાપોશ્નિકોવિયા ડિવેરિકાટા તેલ જથ્થાબંધ વિસારક આવશ્યક તેલ રીડ બર્નર ડિફ્યુઝર માટે નવું

ટૂંકું વર્ણન:

 

2.1. SDE ની તૈયારી

SD ના રાઇઝોમ હેનહેર્બ કંપની (ગુરી, કોરિયા) પાસેથી સૂકા ઔષધિ તરીકે ખરીદવામાં આવ્યા હતા. કોરિયા ઇન્સ્ટિટ્યૂટ ઑફ ઓરિએન્ટલ મેડિસિન (KIOM) ના ડૉ. ગો-યા ચોઈ દ્વારા છોડની સામગ્રીની વર્ગીકરણની પુષ્ટિ કરવામાં આવી હતી. સ્ટાન્ડર્ડ હર્બલ રિસોર્સિસના કોરિયન હર્બેરિયમમાં વાઉચરનો નમૂનો (નંબર 2014 SDE-6) જમા કરવામાં આવ્યો હતો. SD (320 ગ્રામ) ના સૂકા રાઇઝોમને 70% ઇથેનોલ (2 કલાકના રિફ્લક્સ સાથે) સાથે બે વાર કાઢવામાં આવ્યા હતા અને પછી અર્કને ઓછા દબાણ હેઠળ કેન્દ્રિત કરવામાં આવ્યું હતું. ઉકાળો ફિલ્ટર કરવામાં આવ્યો હતો, તેને 4 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર સંગ્રહિત કરવામાં આવ્યો હતો. ક્રૂડ પ્રારંભિક સામગ્રીમાંથી સૂકા અર્કની ઉપજ 48.13% (w/w) હતી.

 

2.2. ક્વોન્ટિટેટિવ ​​હાઇ-પર્ફોર્મન્સ લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી (HPLC) વિશ્લેષણ

ક્રોમેટોગ્રાફિક વિશ્લેષણ HPLC સિસ્ટમ (વોટર્સ કંપની, મિલફોર્ડ, એમએ, યુએસએ) અને ફોટોોડિયોડ એરે ડિટેક્ટર સાથે કરવામાં આવ્યું હતું. SDE ના HPLC વિશ્લેષણ માટે, પ્રાથમિક-O-glucosylcimifugin સ્ટાન્ડર્ડ કોરિયા પ્રમોશન ઇન્સ્ટિટ્યૂટ ફોર ટ્રેડિશનલ મેડિસિન ઇન્ડસ્ટ્રી (Gyeongsan, Korea) પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યું હતું અનેસેકન્ડ-ઓ-ગ્લુકોસિલ્હામાઉડોલ અને 4′-O-β-ડી-ગ્લુકોસિલ -5-O-મેથાઈલવિસામિનોલને અમારી લેબોરેટરીમાં અલગ કરવામાં આવ્યા હતા અને સ્પેક્ટ્રલ વિશ્લેષણ દ્વારા ઓળખવામાં આવ્યા હતા, મુખ્યત્વે NMR અને MS દ્વારા.

SDE નમૂનાઓ (0.1 મિલિગ્રામ) 70% ઇથેનોલ (10 એમએલ) માં ઓગળેલા હતા. ક્રોમેટોગ્રાફિક વિભાજન XSelect HSS T3 C18 કૉલમ (4.6 × 250 mm, 5) સાથે કરવામાં આવ્યું હતુંμm, Waters Co., Milford, MA, USA). મોબાઇલ તબક્કામાં 1.0 એમએલ/મિનિટના પ્રવાહ દરે પાણી (બી)માં એસિટોનાઇટ્રાઇલ (A) અને 0.1% એસિટિક એસિડનો સમાવેશ થાય છે. મલ્ટિ-સ્ટેપ ગ્રેડિયન્ટ પ્રોગ્રામનો ઉપયોગ નીચે પ્રમાણે કરવામાં આવ્યો હતો: 5% A (0 મિનિટ), 5–20% A (0–10 મિનિટ), 20% A (10–23 મિનિટ), અને 20–65% A (23–40 મિનિટ ). શોધ તરંગલંબાઇ 210-400 nm પર સ્કેન કરવામાં આવી હતી અને 254 nm પર રેકોર્ડ કરવામાં આવી હતી. ઈન્જેક્શન વોલ્યુમ 10.0 હતુંμL. ત્રણ ક્રોમોન્સના નિર્ધારણ માટેના માનક ઉકેલો 7.781 mg/mL (પ્રિમ-O-ગ્લુકોસિલસિમિફ્યુગિન), 31.125 mg/mL (4′-O-β-ડી-ગ્લુકોસિલ -5-O-મેથાઈલવિસામીનોલ), અને 31.125 એમજી/એમએલ (સેકન્ડ-ઓ-ગ્લુકોસિલ્હામાઉડોલ) મિથેનોલમાં અને 4°C પર રાખવામાં આવે છે.

2.3. બળતરા વિરોધી પ્રવૃત્તિનું મૂલ્યાંકનવિટ્રો માં

2.3.1. સેલ કલ્ચર અને સેમ્પલ ટ્રીટમેન્ટ

RAW 264.7 કોષો અમેરિકન ટાઈપ કલ્ચર કલેક્શન (ATCC, Manassas, VA, USA)માંથી મેળવવામાં આવ્યા હતા અને 1% એન્ટિબાયોટિક્સ અને 5.5% FBS ધરાવતા DMEM માધ્યમમાં ઉગાડવામાં આવ્યા હતા. કોષો 5% CO2 ના ભેજવાળા વાતાવરણમાં 37 ° સે તાપમાને ઉકાળવામાં આવ્યા હતા. કોષોને ઉત્તેજીત કરવા માટે, માધ્યમને તાજા DMEM માધ્યમથી બદલવામાં આવ્યું હતું, અને લિપોપોલિસેકરાઇડ (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) 1 પર.μSDE (200 અથવા 400) ની હાજરી અથવા ગેરહાજરીમાં g/mL ઉમેરવામાં આવ્યું હતુંμg/mL) વધારાના 24 કલાક માટે.

2.3.2. નાઈટ્રિક ઑકસાઈડ (NO), પ્રોસ્ટાગ્લાન્ડિન E2 (PGE2), ગાંઠ નેક્રોસિસ પરિબળનું નિર્ધારણ-α(TNF-α), અને ઇન્ટરલ્યુકિન -6 (IL-6) ઉત્પાદન

કોષોને SDE સાથે સારવાર આપવામાં આવી હતી અને 24 કલાક માટે LPS સાથે ઉત્તેજિત કરવામાં આવ્યા હતા. અગાઉના અભ્યાસ અનુસાર ગ્રીસ રીએજન્ટનો ઉપયોગ કરીને નાઈટ્રાઈટને માપીને કોઈ ઉત્પાદનનું વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું ન હતું [12]. બળતરા સાઇટોકીન્સ PGE2, TNF-નો સ્ત્રાવα, અને IL-6 નિર્માતાની સૂચનાઓ અનુસાર ELISA કિટ (R&D સિસ્ટમ્સ) નો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવ્યું હતું. NO અને સાયટોકાઇન ઉત્પાદન પર SDE ની અસરો 540 nm અથવા 450 nm પર Wallac EnVision નો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવી હતી.™માઇક્રોપ્લેટ રીડર (PerkinElmer).

2.4. એન્ટિઓસ્ટિઓઆર્થરાઇટિસ પ્રવૃત્તિનું મૂલ્યાંકનVivo માં

2.4.1. પ્રાણીઓ

નર સ્પ્રેગ-ડાવલી ઉંદરો (7 અઠવાડિયા જૂના) સામટાકો ઇન્ક. (ઓસાન, કોરિયા) પાસેથી ખરીદવામાં આવ્યા હતા અને 12-કલાકના પ્રકાશ/શ્યામ ચક્ર સાથે નિયંત્રિત પરિસ્થિતિઓમાં રાખવામાં આવ્યા હતા.°C અને% ભેજ. ઉંદરોને પ્રયોગશાળા આહાર અને પાણી આપવામાં આવ્યું હતુંજાહેરાત લિબિટમ. તમામ પ્રાયોગિક પ્રક્રિયાઓ નેશનલ ઇન્સ્ટિટ્યૂટ ઑફ હેલ્થ (NIH) માર્ગદર્શિકાના પાલનમાં કરવામાં આવી હતી અને ડેજેઓન યુનિવર્સિટી (ડેજેઓન, કોરિયા પ્રજાસત્તાક) ની એનિમલ કેર એન્ડ યુઝ કમિટી દ્વારા મંજૂર કરવામાં આવી હતી.

2.4.2. ઉંદરોમાં MIA સાથે OA નું ઇન્ડક્શન

અભ્યાસની શરૂઆત પહેલા પ્રાણીઓને રેન્ડમાઇઝ કરવામાં આવ્યા હતા અને સારવાર જૂથોને સોંપવામાં આવ્યા હતા (જૂથ દીઠ). MIA સોલ્યુશન (3 mg/50μ0.9% ક્ષારનું એલ) કેટામાઇન અને ઝાયલાઝીનના મિશ્રણથી પ્રેરિત એનેસ્થેસિયા હેઠળ જમણા ઘૂંટણની ઇન્ટ્રા-આર્ટિક્યુલર જગ્યામાં સીધું ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યું હતું. ઉંદરોને અવ્યવસ્થિત રીતે ચાર જૂથોમાં વિભાજિત કરવામાં આવ્યા હતા: (1) MIA ઈન્જેક્શન વિનાનું ખારા જૂથ, (2) MIA ઈન્જેક્શન સાથે MIA જૂથ, (3) MIA ઈન્જેક્શન સાથે SDE-સારવાર કરાયેલ જૂથ (200 mg/kg), અને (4) ) ઇન્ડોમેથાસિન- (IM-) સારવાર કરાયેલ જૂથ (2 મિલિગ્રામ/કિલો) MIA ઇન્જેક્શન સાથે. MIA ઈન્જેક્શનના 1 અઠવાડિયા પહેલા 4 અઠવાડિયા માટે SDE અને IM સાથે ઉંદરોને મૌખિક રીતે સંચાલિત કરવામાં આવ્યા હતા. આ અભ્યાસમાં વપરાયેલ SDE અને IM ની માત્રા અગાઉના અભ્યાસોમાં કાર્યરત લોકો પર આધારિત હતી [10,13,14].

2.4.3. હિંદપવ વજન-બેરિંગ વિતરણનું માપ

OA ઇન્ડક્શન પછી, હિંડપૉઝની વજન-વહન ક્ષમતામાં મૂળ સંતુલન ખોરવાઈ ગયું હતું. એક અસમર્થતા પરીક્ષક (લિંટન ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટેશન, નોર્ફોક, યુકે) નો ઉપયોગ વજન-વહન સહિષ્ણુતામાં ફેરફારોનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે કરવામાં આવ્યો હતો. ઉંદરોને કાળજીપૂર્વક માપન ચેમ્બરમાં મૂકવામાં આવ્યા હતા. પાછળના અંગો દ્વારા વજન વહન કરનાર બળ 3 સેકંડના સમયગાળામાં સરેરાશ કરવામાં આવ્યું હતું. વજન વિતરણ ગુણોત્તરની ગણતરી નીચેના સમીકરણ દ્વારા કરવામાં આવી હતી: [જમણા પાછળના અંગ પરનું વજન/(જમણા પાછળના અંગ પરનું વજન + ડાબા પાછળના અંગ પરનું વજન)] × 100 [15].

2.4.4. સીરમ સાયટોકાઇન સ્તરોનું માપન

લોહીના નમૂનાઓ 1,500 ગ્રામ પર 10 મિનિટ માટે 4°C પર સેન્ટ્રીફ્યુજ કરવામાં આવ્યા હતા; પછી સીરમ એકત્ર કરવામાં આવ્યું અને ઉપયોગ થાય ત્યાં સુધી −70°C પર સંગ્રહિત કરવામાં આવ્યું. IL-1 ના સ્તરોβ, IL-6, TNF-α, અને સીરમમાં PGE2 ને ઉત્પાદકની સૂચનાઓ અનુસાર R&D સિસ્ટમ્સ (Minneapolis, MN, USA) માંથી ELISA કિટ્સનો ઉપયોગ કરીને માપવામાં આવ્યું હતું.

2.4.5. રીઅલ-ટાઇમ જથ્થાત્મક RT-PCR વિશ્લેષણ

TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) નો ઉપયોગ કરીને ઘૂંટણની સંયુક્ત પેશીમાંથી કુલ આરએનએ કાઢવામાં આવ્યું હતું, જે સીડીએનએમાં રિવર્સ-ટ્રાન્સ્ક્રાઇબ કરવામાં આવ્યું હતું અને SYBR ગ્રીન (એપ્લાઇડ બાયોસિસ્ટમ્સ) સાથે TM વન સ્ટેપ આરટી પીસીઆર કીટનો ઉપયોગ કરીને પીસીઆર-એમ્પ્લીફાઇડ કરવામાં આવ્યું હતું. , ગ્રાન્ડ આઇલેન્ડ, એનવાય, યુએસએ). એપ્લાઇડ બાયોસિસ્ટમ્સ 7500 રીઅલ-ટાઇમ પીસીઆર સિસ્ટમ (એપ્લાઇડ બાયોસિસ્ટમ્સ, ગ્રાન્ડ આઇલેન્ડ, એનવાય, યુએસએ) નો ઉપયોગ કરીને રીઅલ-ટાઇમ જથ્થાત્મક પીસીઆર કરવામાં આવ્યું હતું. પ્રાઈમર સિક્વન્સ અને પ્રોબ સિક્વન્સ કોષ્ટકમાં બતાવવામાં આવ્યા છે1. નિર્માતાની સૂચનાઓ (એપ્લાઇડ બાયોસિસ્ટમ્સ, ફોસ્ટર, CA, યુએસએ) અનુસાર ડીએનએ પોલિમરેઝ ધરાવતા TaqMan® યુનિવર્સલ પીસીઆર માસ્ટર મિશ્રણ સાથે સેમ્પલ cDNAs અને સમાન પ્રમાણમાં GAPDH cDNA ના અલિકોટ્સને વિસ્તૃત કરવામાં આવ્યા હતા. PCRની સ્થિતિ 50°C પર 2 મિનિટ, 94°C પર 10 મિનિટ, 95°C પર 15s અને 40 ચક્ર માટે 60°C પર 1 મિનિટ હતી. ઉત્પાદકની સૂચનાઓ અનુસાર, લક્ષ્ય જનીનની સાંદ્રતા તુલનાત્મક Ct (એમ્પ્લીફિકેશન પ્લોટ અને થ્રેશોલ્ડ વચ્ચેના ક્રોસ-પોઇન્ટ પર થ્રેશોલ્ડ ચક્ર નંબર) પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવી હતી.

FOB કિંમત:US $0.5 - 9,999 / પીસ

ન્યૂનતમ ઓર્ડર જથ્થો:100 પીસ/પીસ

સપ્લાય ક્ષમતા:10000 પીસ/પીસ પ્રતિ માસ